PEI 25K™轉(zhuǎn)染試劑：基因遞送領(lǐng)域的經(jīng)典之選

一、產(chǎn)品概述與技術(shù)背景

在分子生物學(xué)與基因治療研究領(lǐng)域，陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑因其高效、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)而備受青睞。聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）作為一種經(jīng)典的高電荷密度陽(yáng)離子聚合物，自1995年被Boussif等人shou-ci報(bào)道以來(lái)，已成為實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)化生產(chǎn)中zui-chang-yong的非病毒基因遞送工具之一。

polysciences23966-100（即PEI 25K™，線性聚乙烯亞胺，分子量25,000）由美國(guó)Polysciences公司研發(fā)生產(chǎn)，該公司成立于1961年，在生命科學(xué)試劑領(lǐng)域擁有超過(guò)60年的技術(shù)積累。該產(chǎn)品是一種功能強(qiáng)大、值得信賴且具有成本效益的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑，自問(wèn)世以來(lái)已被quan-qiu數(shù)千家科研機(jī)構(gòu)廣泛采用。

二、產(chǎn)品屬性與規(guī)格參數(shù)

PEI 25K™的化學(xué)本質(zhì)為線性聚乙烯亞胺，分子式為(CH2CH2NH)n，屬于有機(jī)大分子聚合物。其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)使其在任何pH環(huán)境下都能充當(dāng)有效的"質(zhì)子海綿"（proton sponge），這一特性是其高效基因遞送能力的核心基礎(chǔ)。

產(chǎn)品的主要技術(shù)參數(shù)如下：

產(chǎn)品名稱：Polyethylenimine, Linear, MW 25000, Transfection Grade (PEI 25K™)

貨號(hào)：23966-100（100mg規(guī)格，另有1g、5g、10g、50g等多種規(guī)格可選）

分子式：(CH2CH2NH)n

分子量：25,000

CAS號(hào)：9002-98-6；26913-06-4

外觀：白色至黃色固體

熔點(diǎn)：73-75°C

溶解性：熱水、低pH冷水、甲醇和乙醇

不溶于：苯、乙mi和丙酮

三、作用機(jī)制與轉(zhuǎn)染原理

PEI 25K™的作用機(jī)制基于其高陽(yáng)離子電荷密度特性。分子結(jié)構(gòu)中每相隔兩個(gè)碳原子即存在一個(gè)質(zhì)子化的氨基氮原子，使其在任何pH環(huán)境下都能攜帶大量正電荷。當(dāng)用于基因遞送時(shí)，PEI通過(guò)靜電作用與帶負(fù)電荷的DNA分子結(jié)合，形成帶正電的納米級(jí)復(fù)合物（polyplex）。

這些復(fù)合物能夠黏附于細(xì)胞膜表面的負(fù)電荷殘基，并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。進(jìn)入細(xì)胞后，PEI的質(zhì)子化效應(yīng)引發(fā)反離子大量涌入和滲透壓變化，導(dǎo)致內(nèi)體膨脹破裂，從而將DNA釋放至細(xì)胞質(zhì)中，最終進(jìn)入細(xì)胞核實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)。這一"質(zhì)子海綿"機(jī)制確保了高效的基因遞送和表達(dá)。

四、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用表現(xiàn)

polysciences23966-100在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中展現(xiàn)出zhuo-yue的性能，在大范圍內(nèi)提供始終如一的高基因表達(dá)（從96孔板至100L生物反應(yīng)器）。這一規(guī)?；恢滦允蛊涑蔀閺膶?shí)驗(yàn)室研究到工業(yè)化生產(chǎn)的理想選擇。

成本效益顯著：與市場(chǎng)上其他轉(zhuǎn)染方案相比，實(shí)驗(yàn)室自行配制PEI工作液可將總轉(zhuǎn)染成本降低約40%。這一經(jīng)濟(jì)性優(yōu)勢(shì)使其成為工業(yè)化生產(chǎn)單克隆抗體（mABs）、重組抗體（rABs）、雙特異性抗體（bsABs）以及病毒載體（AAV、LV、BEV）的理想選擇。

轉(zhuǎn)染效率可靠：在HEK293T細(xì)胞中，采用DNA與PEI 1:2至1:4的質(zhì)量比進(jìn)行轉(zhuǎn)染，24小時(shí)后即可觀察到目標(biāo)基因的表達(dá)，48-72小時(shí)達(dá)到蛋白表達(dá)峰值。在多種細(xì)胞系中均表現(xiàn)出穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染效率，包括HEK293、CHO、COS-7等常用表達(dá)系統(tǒng)。

應(yīng)用范圍廣泛：廣泛應(yīng)用于重組蛋白/抗體生產(chǎn)、病毒包裝、基因功能研究、RNA干擾等領(lǐng)域。特別適合需要大規(guī)模、可重復(fù)性高的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染應(yīng)用。

五、溶液配制與使用指南

正確的溶液配制是確保轉(zhuǎn)染成功的關(guān)鍵步驟。以下是經(jīng)Polysciences公司驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)配制流程：

所需材料：1g線性聚乙烯亞胺粉末、1升Milli-Q®純水或注射用水（WFI）、12M鹽酸、10M氫O化Na、0.1-0.2µm PES真空無(wú)菌過(guò)濾器、無(wú)菌聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。

配制步驟：

1. 將約450mL純水倒入1升玻璃燒杯中，加入500mg PEI粉末，使用聚四氟乙烯攪拌棒攪拌；

2. 逐滴加入12M鹽酸，將pH調(diào)節(jié)至2.0以下（約需800µL），持續(xù)攪拌2-3小時(shí)直至wan-quan溶解；

3. 逐滴加入10M氫O化Na中和至pH 7.0（約需500µL）；

4. 將溶液轉(zhuǎn)移至量筒，定容至500mL；

5. 使用0.22µm濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌；

6. 分裝后于-20°C保存，工作液可存放于4°C備用。

轉(zhuǎn)染操作建議：

1. 轉(zhuǎn)染前一日將細(xì)胞接種至培養(yǎng)器皿，確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70-90%；

2. 在無(wú)血清培養(yǎng)基中稀釋質(zhì)粒DNA，加入PEI溶液（DNA:PEI質(zhì)量比建議1:2至1:4），輕柔混勻后室溫孵育15分鐘；

3. 將轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至細(xì)胞培養(yǎng)液中，十字形晃動(dòng)培養(yǎng)板使分布均勻；

4. 轉(zhuǎn)染后16-18小時(shí)更換為wan-quan培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)至收獲。

六、產(chǎn)品選擇與購(gòu)買信息

在Polysciences的PEI產(chǎn)品線中，PEI 25K™（貨號(hào)23966系列）與升級(jí)產(chǎn)品PEI MAX（貨號(hào)24765系列，分子量40,000）形成了互補(bǔ)的產(chǎn)品矩陣。PEI 25K™以其成熟的應(yīng)用方案和較高的性價(jià)比，適用于常規(guī)的瞬時(shí)蛋白表達(dá)和抗體生產(chǎn)；而PEI MAX則憑借wan-quan水解的鹽酸鹽形式和更高的水溶性，在病毒包裝等對(duì)細(xì)胞毒性要求更嚴(yán)格的場(chǎng)景中表現(xiàn)更佳。

對(duì)于追求經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方案重現(xiàn)性的研究者，PEI 25K™依然是值得信賴的選擇。其穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)和經(jīng)過(guò)時(shí)間驗(yàn)證的轉(zhuǎn)染效率，使其成為實(shí)驗(yàn)室基因遞送工具箱中的常備試劑。

該產(chǎn)品在中國(guó)地區(qū)可通過(guò)北京百奧創(chuàng)新科技有限公司購(gòu)買，確保zheng-pin保障和技術(shù)支持。提供粉末和液體兩種形式，滿足不同應(yīng)用場(chǎng)景的需求。