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更新時間:2026-03-24
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線性聚乙烯亞胺(PEI)轉染技術:基因遞送的高效解決方案
一、PEI轉染技術概述
在分子生物學與基因治療研究領域,陽離子聚合物轉染試劑因其高效、經濟的特點而備受青睞。其中,聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)作為一種經典的高電荷密度陽離子聚合物,自1995年被Boussif等人shou-ci報道以來,已成為實驗室和工業化生產中zui-chang-yong的非病毒基因遞送工具之一。
polysciences PEI轉染試劑(包括PEI 25K™和PEI MAX等系列)由美國Polysciences公司研發生產,該公司成立于1961年,在生命科學試劑領域擁有超過60年的技術積累。這些試劑憑借其zhuo-yue的轉染效率和可靠的批次穩定性,成為HEK293、CHO等常用表達系統進行瞬時轉染的shou-xuan工具。
二、作用機制與分子特性
聚乙烯亞胺是一種具有高陽離子電荷密度的有機大分子,其分子結構中每相隔兩個碳原子即存在一個質子化的氨基氮原子,使其在任何pH環境下都能充當有效的"質子海綿"(proton sponge)。
當用于基因遞送時,PEI通過靜電作用與帶負電荷的DNA分子結合,形成帶正電的納米級復合物(polyplex)。這些復合物能夠黏附于細胞膜表面的負電荷殘基,并通過內吞作用進入細胞。進入細胞后,PEI的質子化效應引發反離子大量涌入和滲透壓變化,導致內體膨脹破裂,從而將DNA釋放至細胞質中,最終進入細胞核實現基因表達。
PEI 25K™(分子量25,000)和PEI MAX(分子量40,000)是該系列的兩個主要產品。PEI 25K™以其成熟的應用方案和較高的性價比,適用于常規的瞬時蛋白表達和抗體生產;而PEI MAX則憑借wan-quan水解的鹽酸鹽形式和更高的水溶性,在病毒包裝等對細胞毒性要求更嚴格的場景中表現更佳。
三、應用優勢與實驗表現
在HEK293和CHO表達系統中,該系列試劑展現出從96孔板到100升生物反應器的規模化一致性,能夠穩定實現高水平基因表達。相較于市場上其他轉染方案,實驗室自行配制PEI工作液可將總轉染成本降低約40%,這一經濟性優勢使其成為工業化生產mABs、rABs、bsABs以及病毒載體(AAV、LV、BEV)的理想選擇。
多項研究證實,該產品在多種細胞系中均表現出優異的轉染效率。在HEK293T細胞中,采用DNA與PEI 1:2至1:4的質量比進行轉染,24小時后即可觀察到目標基因的表達,48-72小時達到蛋白表達峰值。對于病毒包裝應用,該試劑能夠支持高滴度慢病毒和腺相關病毒(AAV)的生產。
四、溶液配制與使用指南
正確的溶液配制是確保轉染成功的關鍵步驟。以下是經Polysciences公司驗證的標準配制流程:
所需材料:1g線性聚乙烯亞胺粉末、1升Milli-Q®純水或注射用水(WFI)、12M鹽酸、10M氫O化Na、0.1-0.2µm PES真空無菌過濾器、無菌聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
配制步驟:
1. 將約450mL純水倒入1升玻璃燒杯中,加入500mg PEI粉末,使用聚四氟乙烯攪拌棒攪拌;
2. 逐滴加入12M鹽酸,將pH調節至2.0以下(約需800µL),持續攪拌2-3小時直至wan-quan溶解;
3. 逐滴加入10M氫O化Na中和至pH 7.0(約需500µL);
4. 將溶液轉移至量筒,定容至500mL;
5. 使用0.22µm濾膜進行過濾除菌;
6. 分裝后于-20°C保存,工作液可存放于4°C備用。
轉染操作建議:
1. 轉染前一日將細胞接種至培養器皿,確保轉染時細胞匯合度達到70-90%;
2. 在無血清培養基中稀釋質粒DNA,加入PEI溶液(DNA:PEI質量比建議1:2至1:4),輕柔混勻后室溫孵育15分鐘;
3. 將轉染復合物滴加至細胞培養液中,十字形晃動培養板使分布均勻;
4. 轉染后16-18小時更換為wan-quan培養基,繼續培養至收獲。
五、產品選擇與購買信息
polysciences PEI轉染試劑提供多種包裝規格以滿足不同實驗規模需求。以PEI 25K™(貨號23966系列)為例,提供100mg、1g等多種規格,用戶可根據實驗需求選擇粉末或預配制溶液形式。北京百奧創新科技確保zheng-pin保障和技術支持,歡迎選購。
對于追求經典實驗方案重現性的研究者,PEI 25K™依然是值得信賴的選擇。其穩定的化學性質和經過時間驗證的轉染效率,使其成為實驗室基因遞送工具箱中的常備試劑。而對于需要更高轉染效率和更低細胞毒性的應用場景,PEI MAX(貨號24765系列)則提供了更優的解決方案。
polysciences轉染試劑代理——北京百奧創新科技有限公司:
一、輻射五大服務方向:
1.國內試劑耗材經銷代理;
2.國外試劑訂購(直訂,或境外代理);
3.基因組測序(二代,二代+三代);
4.基因分型(SNP檢測):低/中/中 高通量項目;
5.生物樣本運輸(國內、);
二、多家代理品牌,涉及30多種較有名品牌,經營代理500多個品牌:
Qiagen、Sigma、R&D、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific、Matreya、Sage Science、List Labs、Macrocyclics、Steraloids、NIBSC、mobio、immunodx、cellsystems、medicago、abcam、CST、Roche、Bethyl、sino Biological、clodrosome、adi BIO-WORLD、TOKU-E、HYPHEN BioMed、moltox、ZeptoMetrix、International Humic、biocytex、Toxin Technology 、Streck、Elastin、biomax、Orflo Technologies、Accegen、Advbiomart、genlantis、R&D、Cygnus Technologies LLC、Enzyme Research、Bio/Data Corporation、Greer Lab 、Solarbio、bangslabs、bioline、musechem、Novocastra stemrd、hyphen-biomed、polyplus、moltox 、exiqon、pentapharm、verichemlabs、GenStar、ALZET、lucernatechnologies 、meridian、origene、zimmerpeacocktech、horizondiscovery、Reagents、megazyme、elisasystems………
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